Преношење ћелија се односи на процес поделе ћелија на мање делове, њихово поновно сејање у други контејнер за културу, а затим њихово поновно култивисање. Бочице за ћелијску културу су потрошни материјал који се обично користи током пасирања. Дакле, који су специфични кораци за пролаз ћелија?
1. Извадите боцу са ћелијском културом из инкубатора, попрскајте 75-постотни алкохол на површину боце са боцом за распршивање алкохола и пренесите је на ултра-чисту клупу.
2. Отворите поклопац бочице за ћелијску културу, нежно аспирирајте стари медијум, додајте одговарајућу количину раствора ПБС пуфера помоћу Пастерове пипете, исперите је 1-2 пута и баците раствор ПБС пуфера.
3. Боца ћелијске културе се може допунити са 1-2мл трипсина помоћу пипете, а „крст“ се протресе да би у потпуности контактирао трипсин и ћелије.
4. Пренесите боцу за ћелијску културу која садржи трипсин у фазу инвертованог микроскопа, посматрајте варење ћелија под микроскопом и када ћелије постану заобљене и велики број отпада, припремите се за прекид варења. Попрскајте 75-постотни алкохол на површину боце и пренесите је на ултра-чисту клупу.
5. Боца ћелијске културе је допуњена са једнаком количином медијума који садржи серум и варење је прекинуто. Пипета је потпуно надувана и претучена да би ћелије потпуно отпале.
6. Пребаците помешану течност у боци за културу ћелија у епрувету за центрифугирање, избалансирајте је и центрифугирајте око 5 минута.
7. Након што се боца са ћелијском културом центрифугира, попрскајте површину епрувете за центрифугирање боцом за распршивање алкохола, пребаците је у ултра-чисту клупу, отворите поклопац и сипајте супернатант у цилиндар за отпадну течност.
8. Додајте одговарајућу запремину медијума који садржи серум у боцу за ћелијску културу и нежно је умутите пипетом или Пастеровом пипетом да бисте припремили ћелијску суспензију.
9. Поделите суспензију ћелија у 2 (или више) стерилне и чисте бочице за културу ћелија, додајте одговарајућу количину медијума и затворите поклопац.
10. Поставите подељене бочице са ћелијском културом на обрнути микроскоп и посматрајте стање ћелије. Број ћелија треба да буде загарантован. Премало ћелија ће утицати на њихов раст.
11. Направите ознаку на бочици боце са ћелијском културом, наводећи време проласка, тип ћелије, оператера и друге информације. Пре него што га ставите у инкубатор, попрскајте мало алкохола по површини боце, организујте операциони сто, обришите ултра чисту клупу са 75 одсто алкохола и очистите отпадну течност и смеће.
Горе наведено је специфичан процес пасирања ћелија помоћу боца за ћелијску културу. Приликом операције треба обратити пажњу на ношење стерилне одеће, стерилних рукавица и маски, а целу операцију треба обавити асептично како би се избегла контаминација ћелија.
на епрувете за цитратне крви, епрувете за сепаратор едта, нефилтриране врхове за пипете, произвођач врхова за гел пипете